问题标题:
光学显微镜中油镜的原理是什么?观察微生物为什么要使用油镜?
问题描述:
光学显微镜中油镜的原理是什么?观察微生物为什么要使用油镜?
钱芳回答:
油镜,光学显微镜之一,使用时,镜头浸入油中(通常是香柏油),用于观察较细微的结构,是实验室常用的显微镜之一,清晰度略高于普通光学显微镜,用于观察衣原体,细菌,细胞器等.
油镜的透镜很小,光线通过玻片与油镜头之间的空气时,因介质密度不同,发生折射或全反射,使射入透镜的光线减少,物象显现不清.若在油镜与载玻片之间加入和玻璃折射率(n=1.52)相近的香柏油(n=1.515),则使进入透镜的光线增多,视野亮度增强,使物象明亮清晰.
由于细菌体积微小,故在细菌的形态学研究中,经常需要借助显微镜油镜,才能比较清楚地进行观察.因此,必须熟练地掌握油镜的使用及保护法.
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油镜使用注意:
(1)在使用油镜之前,必须先经低、高倍镜观察,然后将需进一步放大的部分移到视野的中心.
(2)将集光器上升到最高位置,光圈开到最大.
(3)转动转换器,使高倍镜头离开通光孔,在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油,然后慢慢转动油镜,在转换油镜时,从侧面水平注视镜头与玻片的距离,使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜.
(4)用左眼观察目镜,并慢慢转动细调节器至物象清晰为止.
如果不出现物象或者目标不理想要重找,在加油区之外重找时应按:低倍→高倍→油镜程序.在加油区内重找应按:低倍→油镜程序,不得经高倍镜,以免油沾污镜头.
(5)油镜使用完毕,先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头上和标本上的香柏油擦去,然后再用干擦镜纸擦干净.
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(一)油镜头的识别:
各接物镜的放大率可由其外形辨认,镜头长度越大,镜片直径越小,放大倍数大;反之,放大倍数小.油镜头长度大于低、高倍镜,镜头下缘一般刻有一圈黑线或白线,并刻有100×、1.25或oil等字样.
(二)油镜的使用法:
1、使用显微镜油镜时,必须将显微镜端正直立桌上,不得将镜臂弯曲,使载物台倾斜,以免香柏油流溢,影响观察,污染台面.
2、对光:
采用天然光为光源时,宜用平面反光镜;若用人工灯光时,则用凹面镜.
首先打开光圈,转动反光镜,使光线集中于集光器.可根据需要,上下移动集光器和缩放光圈,以获得最佳光度.
一般用低倍镜或高倍镜观察物象或用油镜检查不染色标本时,需下降集光器并适当地缩小光圈,使光度减弱;若用油镜检查染色标本时,光度宜强.应将显微镜亮度开关调至最亮,光圈完全打开,集光器上升至与载物台相平.
3、调焦距:
A、将标本片放载物台上,用标本推进器固定,将欲检部分移至接物镜下.先用低倍镜找出标本的位置,然后提高镜筒,在标本的待检部位滴镜油一滴,再换油镜观察.
B、转动粗调节器使载物台徐徐上升(或使镜筒渐渐下降),直至油镜头浸没至油中.此时眼睛应从侧面观察,以免压碎标本片和损坏镜头.
C、然后双眼移至接目镜,一面从接目镜观察,一面反方向缓慢地转动粗调节器(下降载物台,或上升镜筒),当出现模糊物象时,换用细调节器,转动至物象清晰为止.
D、观察完毕,应先提高镜筒,并将油镜头扭向一侧,再取下标本片.油镜头使用后,应立即用擦镜纸擦净镜头上的油.若镜油粘稠干结于镜头上,可用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭镜头,并随即用干的镜纸擦去残存的二甲苯,以免二甲苯渗入,溶解用以粘固透镜的胶质物,造成镜片移位或脱落.
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