问题标题:
【cDNA文库的构建过程中需要高质量RNA,但是提取的RNA质量不高,想得到高质量的RNA其纯化步骤是什么】
问题描述:
cDNA文库的构建过程中需要高质量RNA,但是提取的RNA质量不高,想得到高质量的RNA其纯化步骤是什么
梁林泉回答:
分离的总RNA可利用mRNA3'末端含有多聚(A)+的特点,当RNA流经oligo(dT)纤维素柱时,在高盐缓冲液作用下,mRNA被特异的吸附在oligo(dT)纤维素上,然后逐渐降低盐浓度洗脱,在低盐溶液或蒸馏水中,mRNA被洗下.
经过两次oligo(dT)纤维素柱,可得到较纯的mRNA.
详见参考资料
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