问题标题:
回答下列有关单克隆抗体的制备和转基因动物培养的问题.(1)某H蛋白质是一种抗原蛋白,该蛋白也是一种跨膜蛋白,其结构如图所示(抗原特性由胞外区决定).①制备免疫小鼠用的H蛋
问题描述:
回答下列有关单克隆抗体的制备和转基因动物培养的问题.
(1)某H蛋白质是一种抗原蛋白,该蛋白也是一种跨膜蛋白,其结构如图所示(抗原特性由胞外区决定).
①制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建___区基因,转入原核细胞表达并提纯.
②B淋巴细胞成熟于___(填“器官名称”)中.
③若要制备抗H蛋白单克隆抗体,所培养的杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和接受过___刺激的B淋巴细胞的融合而成的杂交瘤细胞.培养过程中应保持培养箱中含有5%的CO2的目的是维持培养液的___.除了含有各种营养成分,满足适宜的温度和酸碱性外,通常还要在细胞培养液中添加一定量的___,以防止培养过程中的污染.此外,应定期___,以便清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害.
(2)胚胎干细胞(ES)可由囊胚的___分离培养获得,导入外源基因的干细胞经扩大培养诱导分化为早期胚胎,随后即可植入经___处理的代孕雌性动物体内,获得转基因动物.
陆晓峰回答:
(1)①H蛋白是一种抗原蛋白,也是一种跨膜蛋白,且抗原特性由胞外区决定,因此制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建胞外区基因,转入原核细胞表达并提纯.
②B淋巴细胞成熟于骨髓中.
③若要制备抗H蛋白单克隆抗体,所培养的杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和接受过H蛋白刺激的B淋巴细胞的融合而成的.5%的CO2的目的是维持培养液的pH.在细胞培养液中添加一定量的抗生素,以防止培养过程中的污染.此外,应定期更换培养液,以便清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害.
(2)胚胎干细胞(ES)来自早期胚胎(囊胚的内细胞团)和原始性腺.胚胎移植时,需要对供体和受体进行同期发情处理,使供受体具有相同的生理状态,保证胚胎移植入相同的生理环境.
故答案为:
(1)①胞外 ②骨髓 ③H蛋白 pH 抗生素 更换培养液
(2)内细胞团 同期发情
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