问题标题:
【(2014•日照二模)如图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图同答:(1)分析可知,科学家获取绿色荧光蛋白基因所运用的限制酶是图中所示的______,最终获得的绿色荧】
问题描述:
(2014•日照二模)如图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图同答:
(1)分析可知,科学家获取绿色荧光蛋白基因所运用的限制酶是图中所示的______,最终获得的绿色荧光蛋白基因的末端类型属于______.
(2)图示工程中,将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程③称为______,常用的方法是______.
(3)图示中,作为受体细胞的去核卵母细胞一般处在______期,常通过______(物理方法)进行激活,使其完成减数分裂和发育进程.
(4)培养图示重组细胞时,将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为______培养基.通常在培养基中还需要加入适量的______等天然成分.
(5)图示重组细胞培养至一定阶段可通过______方法,从而一次获得多个转基因猪.过程⑧的实质是______.
苗春彦回答:
(1)图中所示的限制酶PstI和EcoRⅠ可以切割DNA片段,获取绿色荧光蛋白基因,并不能破坏目的基因.限制酶切割产生的DNA片段末端不平整,即末端为黏性末端.
(2)转化是指将目的基因进人受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和表达的过程.如图示将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程.因受体细胞为动物细胞,常用的方法是显微注射法.
(3)受体细胞常选用去核卵(母)细胞的原因:卵(母)细胞大,容易操作;卵(母)细胞质多,营养丰富;含有促使细胞全能性表达的物质.一般取处在MⅡ中(减数第二次分裂中)期的去核卵母细胞作为受体细胞的,通过电脉冲(或电刺激)进行激活,使其完成减数分裂和发育进程.
(4)培养图示重组细胞时,将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为合成培养基.动物细胞所需的营养物质:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,还需加入血清、血浆等天然物质.通常在培养基中还需要加入适量的血清(或血浆)等天然成分.
(5)胚胎分割采用机械方法将早期胚胎切割,经移植获得同卵双胚或多胚,从而获得较多基因型相同的转基因猪.图示重组细胞培养至桑椹胚或囊胚,可通过胚胎分割、胚胎移植方法,从而一次获得多个转基因猪.过程⑧是胚胎移植过程,其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移.
故答案为:
(1)PstⅠ和EcoRⅠ黏性末端
(2)转化 显微注射法
(3)MⅡ中(减数第二次分裂中) 电脉冲(或电刺激)
(4)合成 血清(或血浆)
(5)胚胎分割、胚胎移植 早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
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