问题标题：
利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如图所示）．图中引物a、b为单链DNA样品片段，它是子链合成延伸的基础．请回答有关问题：（1）PCR扩增开始前，需要向离心管中加
问题描述：
利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如图所示）．图中引物a、b为单链DNA样品片段，它是子链合成延伸的基础．请回答有关问题：
（1）PCR扩增开始前，需要向离心管中加入的物质除了DNA样品，Taq酶 以及缓冲液之外，还需要加入___和___．
（2）A、B、C中属于退火的步骤是___，A过程的目的是___．
（3）C步骤温度为72℃时发挥作用的酶是___．
（4）从理论上分析，PCR技术利用DNA分子的___复制的方式，一个样品DNA分子经n次循环共需消耗引物a的数量为___．
（5）设计引物是PCR技术关键步骤之一．某同学设计的两组引物（引物对B只标注了部分碱基序列）都不合理（如表），请分别说明理由．
引物对AP1：AACTGAAATCTAGCTATC引物对B| P2：GTCCGACTAGTGGCTGTG |
| S1：3′-AACTG-CAGTT-5′ |
| S2：3′-CAGTT-GATTA-5′ |
②引物对B S1局部碱基配对导致自身___而失效；S1和S2之间出现___而失效．
（6）获取目的基因的途径除上述外，还有另外两个途径是___、___．
范青武回答：
（1）PCR扩增开始前，需要向离心管中加入的物质除了DNA样品，Taq酶以及缓冲液之外，还需要加入四种脱氧核苷酸 和引物．
（2）A过程为高温变性，B过程为退火，C过程为中温延伸，目的是使DNA分子解旋．
（3）由于变性的温度是94℃，延伸温度为72℃，故PCR中所需要的酶是热稳定性DNA聚合酶（Taq酶）．
（4）从理论上分析，PCR技术利用DNA分子半保留复制的方式，从理论上推测，一个样品DNA分子经n次循环合成的DNA分子为2n个，而不含引物a的只有1个DNA分子，故共需消耗引物a的数量为2n-1．
（5）据表格中引物的序列可知，引物对A中P1和P2的GC含量差异较大，退火温度不一致．引物对B中S1部分序列互补，会自身折叠出现局部碱基配对而失效；且S1和S2部分序列互补，它们之间会出现局部碱基配对而失效．
（6）获得目的基因的方法有：①从基因文库中获取、②利用PCR技术扩增、③人工合成（化学合成）．
故答案为：
（1）四种脱氧核苷酸 引物
（2）B 使DNA分子解旋
（3）热稳定性DNA聚合酶（Taq酶）
（4）半保留 2n-1
（5）GC 折叠 局部碱基配对
（6）从基因文库获取 化学方法合成
查看更多
八字精批
八字合婚
八字起名
八字财运
2024运势
测终身运
姓名详批
结婚吉日
