问题标题:
【口蹄疫是由RNA病毒引起的一种偶蹄动物传染病.科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗(主要成分:该病毒的一种结构蛋白VP1),过程如图所示.请据图回答下列问题:(1)在上述实】
问题描述:
口蹄疫是由RNA病毒引起的一种偶蹄动物传染病.科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗(主要成分:该病毒的一种结构蛋白VP1),过程如图所示.请据图回答下列问题:
(1)在上述实验过程中所涉及的生物技术工程有____、___,如图所示②成功构建重组质粒的过程中,需要用到的工具酶有___ 和___.
(2)⑤过程代表的是___,经过该过程形成的细胞具有分裂能力强,分化程度低等特点.
(3)⑥培养基中添加___可筛选能表达疫苗的细胞;检测转化成功的蕃茄植株,除检测标记基因产物外,还可采用___技术检测目的基因在蕃茄体内是否转录.
(4)在该过程中,研究人员首先获取了目的基因,并采用___技术对目的基因进行扩增,该技术需要的条件是___、酶、dNTP、模板;然后构建基因表达载体.基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外,还需具有___.
顾启泰回答:
(1)由以上分析可知,上述实验过程涉及的生物技术工程有基因工程、植物细胞工程;基因表达载体的构建过程中,需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体,还需要用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组质粒.
(2)⑤表示脱分化过程,该过程形成的产物是愈伤组织,具有分裂能力强,分化程度低的特点.
(3)由图可知,运载体上的标记基因是卡那霉素抗性基因,因此在⑥培养基中添加卡那霉素可筛选能表达疫苗的细胞;检测目的基因是否转录形成mRNA可采用分子杂交技术,即用DNA分子探针和受体细胞中的mRNA分子进行杂交,观察是否形成杂交带.
(4)PCR技术可在体外快速扩增目的基因,PCR的条件:模板(目的基因)、原料(四种脱氧核苷酸)、引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶).基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外,还需具有标记基因.
故答案为:
(1)基因工程 植物细胞工程(或植物组织培养) 限制酶和DNA连接酶
(2)脱分化
(3)卡那霉素 分子杂交
(4)PCR(聚合酶链式反应) 引物 标记基因
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