问题标题:
(2013•马鞍山一模)绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因,可以合成一种抗TMV蛋白,叶片对TMV具有抗感染性.烟草是重要的经济作物,由于TMV的感染会导致大幅度减产.研究人员利
问题描述:

(2013•马鞍山一模)绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因,可以合成一种抗TMV蛋白,叶片对TMV具有抗感染性.烟草是重要的经济作物,由于TMV的感染会导致大幅度减产.研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草,主要流程如图所示.

(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA,然后合成目的基因.图中过程①表示______,获得的DNA必须在两侧添加______和终止子,还要添加______酶能识别切割的碱基序列.

(2)由图分析,在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是______基因,重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法是______.

(3)在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外,还必须添加______,以保证受体细胞能培养成再生植株.

(4)过程⑥可采取______的方法,检测植株是否合成了抗TMV蛋白.在个体水平的鉴定过程中,可通过______的方法来确定植株是否具有抗性.

林卫中回答:
  (1)过程①表示获得的目的基因,是RNA通过逆转录获得DNA,该DNA两侧应含有相关限制酶的酶切位点,两端还必须有启动子和终止子.   (2)由图分析,⑤过程在含有卡那霉素的培养基上培养,说明构建的重组质粒上含有的标记基因是卡那霉素抗性基因.目的基因导入植物体细胞的方法常用农杆菌转化法.   (3)植物组织培养过程,除需要加入各种营养成分外,还需要添加植物激素,以保证植物生根、发芽过程.   (4)过程⑥需要对表达的产生进行鉴定,可采取抗原-抗体杂交,若从个体水平鉴定,可通过接种烟草花叶病毒的方法来确定植株是否具有抗性.   故答案为:   (1)反转录 启动子 限制性核酸内切   (2)卡那霉素抗性 农杆菌转化法   (3)植物激素   (4)抗原-抗体杂交 接种烟草花叶病毒
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