问题标题:
【如何确定凝胶电泳上的蛋白条带就是所表达外源基因产物】
问题描述:
如何确定凝胶电泳上的蛋白条带就是所表达外源基因产物
方正回答:
首先你根据目的基因预测目的蛋白的大小
然后根据表达情况,在预测附近找特异条带(野生对照),特异条带往往比较浓,因为你目的基因往往插在表达载体的强启动子下游,而且有诱导剂的诱导,表达量很大.
如果表达量很低,在胶上分辨不出来,你可以根据重组蛋白设定抗体,做western-blot,这个灵敏度高,只要表达就能检测出来.
如果胶上看的特异条带很明显,那么你纯化出目的蛋白,做生化测定,进一步说明你蛋白的功能结构
查看更多