问题标题:
蛋白表达时断裂怎么办?我融合表达一个蛋白,在E.Coli,可电泳结果总是断裂的怎么办?
问题描述:
蛋白表达时断裂怎么办?
我融合表达一个蛋白,在E.Coli,可电泳结果总是断裂的
怎么办?
韩毅回答:
1.取质粒酶切或测序确定基因大小/序列正确,中间没有stopcodon
2.做个northernblot看看mRNA大小是否正确
3.增加培养液营养,确保蛋白表达时营养足够,核糖体不会提前脱落
4.蛋白不大可以测序,也可以做个AAA看看构成再分析问题原因
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