问题标题:
【科学家将绿色荧光蛋白(GFP)基因转入小鼠胚胎干细胞(ES)内,GFP基因若表达就会使细胞带有绿色荧光,继而利用带有绿色荧光的ES细胞培育出嵌合型的小鼠用于科学研究,流程如图所示.】
问题描述:
科学家将绿色荧光蛋白(GFP)基因转入小鼠胚胎干细胞(ES)内,GFP基因若表达就会使细胞带有绿色荧光,继而利用带有绿色荧光的ES细胞培育出嵌合型的小鼠用于科学研究,流程如图所示.请回答:
(1)在步骤①中构建基因表达载体时,需要在GFP基因的首端加入___,有了它才能驱动GFP基因转录出mRNA,最终获得GFP.
(2)步骤②的受体细胞是小鼠ES细胞,ES细胞一般从囊胚的___中分离得到.对其进行的初次培养称为___,在培养ES细胞时,细胞充满培养皿底部后停止分裂,这种现象称为___.
(3)图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有___,再通过___技术移入代孕母鼠子宫内继续发育.
(4)该小鼠诞生过程中涉及到的现代生物技术主要有:___.(至少答出3项)
祁伟回答:
(1)启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点,能启动转录过程.因此,构建基因表达载体时,必须在目的基因首端加入启动子.
(2)ES细胞来自早期胚胎(囊胚的内细胞团)或原始性腺.对ES细胞进行的初次培养成为原代培养.在培养ES细胞时,细胞充满培养皿底部后停止分裂,这种现象称为接触抑制.
(3)由图可知,目的基因和标记基因都是GFP基因,因此图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有绿色荧光细胞,再通过胚胎移植技术移入代孕母鼠子宫内继续发育.
(4)由图可知,该小鼠诞生过程中涉及到的现代生物技术主要有基因工程技术、动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植.
故答案为:
(1)启动子
(2)内细胞团 原代培养 接触抑制
(3)绿色荧光细胞 胚胎移植
(4)基因工程技术、动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植
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