问题标题:
【rna转cdna预变性温度是多少】
问题描述:
rna转cdna预变性温度是多少
丁利晶回答:
博凌科为的THERMOscript1stStrandcDNASynthesisKit(第一链耐热反转录试剂盒)反转录温度耐受性比较强,效果不错
本制品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNaseH活性缺失的M-MuLV反转录酶
THERMOscriptHˉRTase.同时经过多点突变,提高了反转录温度耐受性,可以在45-55℃进行反转录.野生型的M-MuLV包含的RNaseH活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA,因此在cDNA第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA.本酶
M-MuLV(RNaseHˉ)的RNaseH活性缺失,与M-MuLV相比,具有更强的延伸能力和稳定性,
可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等.同时更高的反转录温度大大的
提高了GC含量高,二级结构丰富的RNA模板的反转录效率.
注意事项::
1、避免RNase污染.
2、为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品.
3、如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构,可以先只加RNA模板、引物和和RNasefreeH2O混匀,65℃变性5分钟,冰上冷却,短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤.
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