问题标题:
已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图.请回答:(1)①代表的是___过程.为获得A基因表达载体,需用___酶对A基因和运
问题描述:
已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图.
请回答:
(1)①代表的是___过程.为获得A基因表达载体,需用___酶对A基因和运载体进行切割.将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是___.
(2)利用PCR技术扩增A基因时,设计引物序列的主要依据是___,加入引物的作用是___.
(3)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行,并且要严格控制___等条件.
(4)过程③采用的技术是___,获得的X叫___ 细胞.
何明祥回答:
(1)由以上分可知①是逆转录过程.构建基因表达载体时,首先需要用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA和运载体,其次需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA.将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法.
(2)利用PCR技术扩增A基因时,根据A基因两端的部分核苷酸序列设计引物序列,加入引物的作用是与A基因单链相应互补序列结合,然后再DNA聚合酶作用下进行延伸.
(3)PCR扩增目的基因的过程:①高温变性:DNA解旋过程(PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶,高温条件下氢键可自动解开);低温复性:引物结合到互补链DNA上;③中温延伸:合成子链.因此,与体内DNA复制相比较,PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行,并且要严格控制温度等条件.
(4)③过程需要采用动物细胞融合技术,根据图中信息可知X为杂交瘤细胞.
故答案为:
(1)逆转录 限制 显微注射法
(2)A基因两端的部分核苷酸序列 与A基因单链相应互补序列结合,然后再DNA聚合酶作用下进行延伸
(3)温度
(4)动物细胞融合 杂交瘤
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