问题标题:
为什么在PCR反应过程中,使用三个不同的温度变化
问题描述:
为什么在PCR反应过程中,使用三个不同的温度变化
崔庆田回答:
第一个一般在94-95度左右,叫做变性,就是通过加热打开双链.
第二个温度点叫做退火,根据引物的TM算出,一般比TM低5度,有利于引物的结合.
第三个温度叫做延伸,一般采用72度.是引物结合后DNA聚合酶按照模板合成新的链.一分钟一千个碱基对.
如此循环.
现在很多PCR都采用2部法,由于采用了不同的DNA聚合酶(最佳温度60度).这样退火和延伸采用一个温度.
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