问题标题:
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:(1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的___.(2)
问题描述:
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:
(1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的___.
(2)步骤②中,重组胚胎培养到___期时,可从其___分离出ES细胞.
(3)步骤③中,需要构建含有基因Rag2的表达载体.可以根据基因Rag2的___设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段.用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有___酶的酶切位点.
(4)步骤④在特定的诱导下ES细胞成功分化为造血干细胞其原因是___的结果.
(5)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的___,用Rag2蛋白的抗体进行杂交实验.
曹广益回答:
(1)核移植是将体细胞核移植到去核的卵母细胞中,所以实验前要去除卵母细胞的细胞核.(2)步骤②中,重组胚胎培养到囊胚期,可从其内细胞团分离出ES细胞.(3)步骤③是将目的基因导入ES细胞,该过程之前需要构建...
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